摘 要 通過對移植性動物瘤株的抑瘤試驗來證明萌動啟動的赤靈芝孢子對移植性動物腫瘤小動物肝癌、動物肉瘤-180（S-180）及小動物網細胞肉瘤（L-II）的抑瘤作用。無菌條件下將腫瘤細胞懸浮液接種於小動物的右腋皮下，隨機分成陰性對照物，陽性對照物，靈芝孢子粉試驗組分為低、中、高劑量組。給藥7天后處死，剝離腫瘤稱重，計算抑瘤率並作統計學處理。結果，在2~8 g/(kg.d)劑量範圍內動物S-180的抑瘤率為42.3%~82.0%之間，P<0.001.對動物肝癌的抑瘤率為52.2%~86.1%，P值<0.01~0.001.對L-II的抑制率為54.0%~79.6%，此抑制作用有明顯的量效關係。
靈芝為擔子菌綱多孔菌科靈芝屬真菌，自古以來被視為珍貴的延年益壽的藥物。是我國傳統的扶正固本，滋補強壯的珍貴藥用真菌。近年來對靈芝的研究較為廣泛[1~9]。而靈芝孢子則是靈芝發育週期中的另一形態即靈芝生長成熟期從菌蓋彈射出來的象淡霧狀的極其微小的孢子，具有靈芝的全部遺傳活性物質。將休眠狀態中的靈芝孢子萌動啟動產生具有活性基因的生理活性物質（如靈芝多糖、靈芝孢子脂肪酸、靈芝孢子長鏈烷烴、靈芝三萜類化合物、超氧化物歧化酶、Vit E、活性糖蛋白、多種生長因數等），它的生理活性比通常的靈芝孢子高出數倍，能夠最大限度地發揮靈芝孢子粉的藥效。以下是研究學家通過赤靈芝孢子對移植性動物腫瘤肝癌、動物肉瘤-180（S-180）及小鼠網細胞肉瘤（L-II）的抑瘤實驗，實例觀察赤靈芝孢子的抑瘤作用。
1. 取小動物，雌雄各半；動物S-180、動物肝癌、動物網細胞肉瘤。
2. 藥品，萌動啟動赤靈芝孢子口服液；環磷醯胺（CTX）；阿黴素（ADM）。
無菌條件下抽取腹腔保種7天生長良好的腹水型動物S-180、動物肝癌及動物網細胞肉瘤L-II用注射用生理鹽水稀釋後，將腫瘤細胞懸浮液接種於動物的右腋皮下，每只0.2mL。將實驗用動物隨機分為5組，每組10~12只。陰性對照組：CTX 20mg/(kg.d)或AND 1mg/(kg.d)，靈芝孢子低、中、高劑量組：2，4，8 g/(kg.d)。各組小動物均於接種瘤株後24小時開始用灌胃器給藥，低、中劑量組每天上午給藥1次，高劑量組上午、下午各給藥1次。連續用藥7天。觀察各組小動物的活動狀態、皮毛光澤度及糞便性狀，在最後一次給藥後次日處死，用天平稱動物體重，用手術刀剝離腫瘤用天平稱瘤重。以抑瘤率來判斷抑瘤作用。
靈芝孢子粉對動物S-180的抑瘤作用，靈芝孢子粉對動物肝癌的抑制作用，靈芝孢子對動物L-II的抑制作用，通過資料測量和統計分別列表為：表1，表2，表3。
|
表1 靈芝孢子粉對動物移植性腫瘤S-180的作用
|
|
組別
|
劑量
（g/kg.d）
|
動物數
始/末
|
體重（g）
|
瘤重（g）
x均值±s
|
抑瘤率
（%）
|
P值（與對照組比）
|
|
始 末 變化
|
|
對照組
|
—
|
10/10
|
20.80±0.60
|
26.10±0.50
|
+5.30
|
2.01±0.31
|
|
|
|
CTX
|
0.02
|
10/10
|
21.02±0.50
|
24.30±0.40
|
+3.28
|
0.80±0.22
|
60.2
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
10/10
|
21.01±0.40
|
26.61±0.31
|
+5.50
|
1.16±0.23
|
42.3
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
10/10/
|
21.02±0.50
|
26.63±0.20
|
+5.51
|
0.87±0.24
|
56.2
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
10/10
|
21.20±0.30
|
27.35±0.35
|
+6.15
|
0.40±0.22
|
79.3
|
<0.001
|
|
|
|
對照組
|
—
|
10/10
|
20.75±0.80
|
25.08±0.84
|
+4.33
|
2.17±0.42
|
|
|
|
CTX
|
0.02
|
10/10
|
21.25±0.80
|
24.65±1.10
|
+3.40
|
0.86±0.21
|
60.4
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
10/10
|
21.05±0.70
|
25.26±0.95
|
+4.21
|
1.20±0.23
|
44.9
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
10/10
|
21.25±0.50
|
25.27±1.16
|
+4.32
|
0.94±0.24
|
56.9
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
10/10
|
21.35±0.60
|
26.42±1.20
|
+5.07
|
0.39±0.12
|
82.0
|
<0.001
|
|
|
|
對照組
|
—
|
10/10
|
20.65±0.60
|
25.30±0.44
|
+4.65
|
2.17±0.42
|
|
|
|
CTX
|
0.02
|
10/10
|
21.23±0.70
|
24.33±0.80
|
+3.03
|
0.87±0.24
|
60.1
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
10/10
|
21.05±0.70
|
26.19±0.97
|
+5.14
|
1.19±0.13
|
45.2
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
10/10
|
21.35±0.40
|
25.84±1.03
|
+4.49
|
0.93±0.21
|
57.3
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
10/10
|
21.40±0.60
|
27.28±0.81
|
+5.88
|
0.39±0.12
|
82.0
|
<0.001
|
如表1，低劑量組3次實驗的抑瘤率分別為42.3%、44.9%及45.2%；中劑量組分別為56.2%、56.9%、及57.3%；高劑量組分別為79.3%、81.9%及82.0%。各用藥組平均瘤重與陰性對照組就、平均瘤重比P<0.001。
|
表2 靈芝孢子粉對動物移植性腫瘤動物肝癌的作用
|
|
組別
|
劑量
（g/kg.d）
|
動物數
始/末
|
體重（g）
|
瘤重（g）
x均值±s
|
抑瘤率
（%）
|
P值（與對照組比）
|
|
始 末 變化
|
|
對照組
|
—
|
10/10
|
21.43±1.11
|
30.66±3.76
|
+9.23
|
1.46±0.33
|
|
|
|
CTX
|
0.02
|
10/10
|
21.68±1.05
|
26.72±2.09
|
+5.04
|
0.22±0.12
|
84.8
|
<0.01
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
10/10
|
20.50±0.50
|
28.60±1.90
|
+8.11
|
0.66±0.14
|
54.7
|
<0.01
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
10/10/
|
20.78±0.84
|
26.67±2.83
|
+5.89
|
0.37±0.22
|
74.5
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
10/10
|
20.85±0.75
|
26.71±1.84
|
+5.86
|
0.20±0.13
|
86.1
|
<0.01
|
|
|
|
對照組
|
—
|
10/9
|
21.88±1.17
|
34.73±4.99
|
+12.9
|
2.34±0.61
|
|
|
|
CTX
|
0.02
|
10/10
|
21.71±1.05
|
31.49±4.39
|
+9.78
|
0.66±0.24
|
71.7
|
<0.01
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
10/10
|
22.07±1.03
|
30.54±3.38
|
+8.47
|
0.74±0.23
|
62.8
|
<0.01
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
10/10
|
21.87±1.03
|
31.16±3.07
|
+9.92
|
0.52±0.12
|
77.7
|
<0.01
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
10/9
|
21.90±0.90
|
30.94±2.38
|
+9.00
|
0.44±0.24
|
81.0
|
<0.01
|
|
|
|
對照組
|
—
|
12/12
|
22.11±1.04
|
29.00±2.00
|
+6.89
|
1.57±0.22
|
|
|
|
CTX
|
0.02
|
12/12
|
22.09±1.09
|
28.84±2.27
|
+6.75
|
0.46±0.14
|
70.7
|
<0.01
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
12/12
|
22.21±1.21
|
30.37±2.73
|
+8.16
|
0.75±0.61
|
52.2
|
<0.01
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
12/12
|
22.13±1.35
|
29.83±2.58
|
+7.70
|
0.57±0.23
|
63.7
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
12/12
|
22.20±1.15
|
29.96±2.86
|
+7.76
|
0.42±0.22
|
73.2
|
<0.001
|
如表2，低劑量3次實驗的抑瘤率分別為54.7%、62.8%及52.2%；中劑量組分別為74.5%、77.7%及63.7%；高劑量組分別為：86.1%、81.04%及73.2%。各用藥組平均瘤重與陰性對照組平均瘤重比P<0.01~0.001。
|
表3 靈芝孢子粉對動物移植性腫瘤L-II的作用
|
|
組別
|
劑量
（g/kg.d）
|
動物數
始/末
|
體重（g）
|
瘤重（g）
x均值±s
|
抑瘤率
（%）
|
P值（與對照組比）
|
|
始 末 變化
|
|
對照組
|
—
|
10/10
|
20.89±1.01
|
30.46±1.86
|
+9.61
|
1.21±0.41
|
|
|
|
CTX
|
0.001
|
10/10
|
20.88±1.03
|
27.86±1.84
|
+7.04
|
0.78±0.26
|
64.7
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
10/10
|
20.88±1.04
|
30.62±1.47
|
+9.68
|
0.97±0.08
|
56.1
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
10/10/
|
20.88±1.04
|
30.73±1.08
|
+9.82
|
0.67±0.12
|
69.9
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
10/10
|
20.88±1.04
|
32.51±1.93
|
+11.6
|
0.45±0.13
|
79.6
|
<0.001
|
|
|
|
對照組
|
—
|
12/12
|
21.08±0.90
|
30.85±2.41
|
+9.77
|
2.34±0.61
|
|
|
|
CTX
|
0.001
|
12/12
|
21.17±0.83
|
28.67±0.15
|
+7.05
|
0.78±0.33
|
66.0
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
12/12
|
21.14±0.65
|
30.19±2.16
|
+9.05
|
0.76±0.30
|
66.8
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
12/12
|
21.08±0.79
|
29.92±1.16
|
+8.83
|
0.66±0.26
|
70.9
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
12/12
|
21.17±0.83
|
31.58±2.97
|
+10.4
|
0.54±0.24
|
76.2
|
<0.001
|
|
|
|
對照組
|
—
|
12/12
|
22.42±0.51
|
29.22±2.64
|
+6.80
|
1.72±0.44
|
|
|
|
CTX
|
0.001
|
12/12
|
22.44±0.61
|
27.74±0.74
|
+5.30
|
0.74±0.26
|
56.8
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
2
|
12/12
|
22.38±0.59
|
28.55±3.36
|
+6.17
|
0.79±0.31
|
54.0
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
4
|
12/12
|
22.34±0.39
|
30.64±3.21
|
+8.30
|
0.50±0.17
|
70.9
|
<0.001
|
|
靈芝孢子粉
|
8
|
12/12
|
22.55±0.89
|
29.53±4.41
|
+6.98
|
0.36±0.22
|
79.4
|
<0.001
|
如表3，低劑量組3次實驗的抑瘤率分別為56.1%、66.8%及54.0%；中劑量組分別為66.9%、70.9%及70.9%；高劑量組分別為：79.6%、76.2%及79.4%。各用藥組平均瘤重與陰性對照組平均瘤重比P<0.001
實驗證明，靈芝孢子在2~8g/(kg.d)的劑量範圍內，試驗組小動物狀況良好，未見有毒副作用，小動物活躍、毛色有光澤、未見有松毛、脫毛現象，大便成型，無死亡情況。
早已有文獻報導靈芝孢子粉在體外實驗有抗腫瘤作用[10]，瀋陽醫科大學陳陵際等[10]運用MTT法和SRB法，觀察到主要成分為靈芝精粉和靈芝孢子粉的中華靈芝寶對白血病和多種人癌實體腫瘤細胞的體外生長均有明顯的抑制作用。本次研究又運用體內抑瘤實驗，結果表明萌動期活化的靈芝孢子粉確有明顯的抑制移植性動物肝癌腫瘤、肉瘤S-180及網細胞肉瘤L-II生長的作用，在2~8g/(kg.d)的劑量範圍內，對動物肝癌、S-180和L-II的抑瘤率分別在52.2%~86.1%，44.9%~82.0%和54.0%~79.6%之間。有明顯的量效關係。它的抑制腫瘤作用機制可能系通過調節和提高機體的免疫功能而實現的。
參 考 文 獻
1 何來英，等。中國食品衛生雜誌，1997，9（2）：32
2 叢 錚，等。北京醫學院學報，1981，13（1）：6
3 陳小君，等。中華腫瘤雜誌，1995，17（增刊）：151
4 陳小君，等。實驗動物科學與管理，1996，13（3）：27
5 Wang S Y，et al. Int J Cancer，1997,70:699
6 Hirofumi Maruyana，et al. Karst J Pharmacobiodyn，1989，12：118
7 陳小君，等。中華放射醫學與防護雜誌，1996，16（2）：122
8 李榮芷，等。老年學雜質，1992，12（3）：184
9 尹進，等。實用中西醫結合雜志，1996，9（6）：333
10 陳陵際，等。國外醫學-腫瘤學分冊，1998，25（5）：78
* 陳小君 女，中山醫科大學腫瘤研究所教授，研究生導師。1960年畢業於中山醫學院，繼續攻讀生物化學研究生，留校後從事抗癌藥物的藥理、腫瘤化療及腫瘤分子生物學的研究，發表論文多篇，曾獲國家教委，廣東省衛生廳，高教廳科技進步獎，並參加《現代醫學進展》的編寫及《維生素，營養與癌》的主譯者之一。
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