松杉靈芝Ganoderma tsugae Murr.為擔子菌綱多孔菌科靈芝屬真菌,分佈于黑龍江、吉林、甘肅等省,民間多當靈芝入藥,具有扶正固本,滋補強壯等功效。近年來有其具有增強脾臟NK細胞活性、促血漿IFN因數生成及保肝、抗腫瘤的作用[1]。為了進一步研究其活性成分,本實驗對松杉靈芝子實體進行提取分離,從其醋酸乙酯部分分離得到的6個化合物,其結構分別鑒定為:靈芝酸B(ganoderic acid B,I)、靈芝酸B甲酯(methyl ganoderate B,II)、赤芝酸C甲酯(methyl lucidenate C,III)、赤芝酸A(lucidenic acid A,IV)、赤芝酸A甲酯(methyl lucidenate A,V)和靈芝酮二醇(ganodermanondiol,VI)。
1. 儀器與材料
XT4—100顯微熔點測定儀; Autospec Ultima ETOF 質譜儀;Mercury—500型核磁共振儀;人工栽培松杉靈芝子實體。
2. 提取分離
把10千克松杉靈芝子實體進行粉碎,用95%乙醇回流提取3次,合併提取液,然後減壓濃縮至幹,得到浸膏632.3g。浸膏混懸水溶液分別用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取。其中醋酸乙酯部分282.1g(100~200目矽膠400g拌樣,2650g填柱),以氯仿-甲醇梯度洗脫,共分成7個部分,I:氯仿部分25.48g;II:氯仿-甲醇(95:5)162.24g;III:氯仿-甲醇(9:1)33.25g;IV:氯仿-甲醇(8:2)26.70g;V:氯仿-甲醇(7:3)6.32g;VI:氯仿-甲醇(1:1)1.82g;VII:甲醇部分3.58g。II部分經反復矽膠柱色譜,從中分離得到化合物I~VI。
3. 結構鑒定
化合物I:無色針晶,mp 233~235°C。Lieber-mann-Burchard 反應陽性。經鑒定,化合物I為靈芝酸B。
化合物II:無色結晶,mp 203~204°C。Lieber-mann-Burchard反應陽性。經鑒定,化合物II為靈芝酸B甲酯。
化合物III:無色結晶,mp199~200°C。Lieber-mann-Burchard反應陽性。經鑒定,化合物III為赤芝酸C甲酯。
化合物IV:白色針晶,mp294~295°C。Lieber-mann-Burchard反應陽性。經鑒定,化合物IV為赤芝酸A。[2]
化合物V:白色針晶,mp165~168°C。Lieber-mann-Burchard反應陽性。經鑒定化合物V為赤芝酸A甲酯。
化合物VI:白色結晶,mp182~183°C。Lieber-mann-Burchard反應陽性。經鑒定化合物VI為靈芝酮二醇。
參考文獻
[1] Lin Z B. Modern Research of Ganoderma (靈芝的現代研究) [M]. 2nd ed. Beijing:Beijing MedicalUniversity Publishing House,2001.
[2] Luo J, Lin Z B. A new triterpene from the fruiting bodies of Ganodrma Lucidum [J]. Acta Pharm Sin (藥學學報), 2001,36(8):595-598
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